隨著動物細胞培養技術在組織學與胚胎學、細胞生物學、腫瘤學、免疫學、營養學、藥理學、毒理學等學科的廣泛應用,促使細胞培養技術的普及已成為一種可能。目前,有許多基層科研機構正在建立動物細胞培養實驗室,現就細胞培養室的硬件建設談點看法,供參考。
1 總體原則
1.1 凈、污分流 細胞培養室與相關輔助用房必須分開。培養室內環境要求清潔、空氣清新、無塵、干燥。
1.2 布局合理,方便操作 所有實驗室的布局要求統一、協調,最好相鄰,以利于工作;室內各項設備安排要緊湊,節省空間,方便工作,避免交叉干擾。
2 細胞培養實驗室
2.1 準備室 主要用于培養器皿的洗滌、消毒、培養物的準備和物資保存等。為避免相互間不必要的生物或化學污染,可以數間小室組成為佳;準備室應具備良好的通風和采光,但應避免灰塵污染。
2.1.1 洗滌區 設有水槽、洗滌池,地面應設置地漏,以利水漬快速干燥。
2.1.2 消毒區 供物品和器械消毒及烘干用,常用消毒方法有干熱法和濕熱法。因設備耗電量大、產熱量高,應單獨配備供電線路。
2.1.3 制水區 用于制備符合實驗要求的清潔水,以供洗滌培養器具和配制培養液用。要求供、排水方便。
2.1.4 控溫設備區 主要放置冰箱、低溫冷藏箱、培養箱等設備,以保存實驗室內需低溫保存的物品,如細胞株、某些試劑、酶、培養基、配制好的溶液及供實驗室內常規培養和孵化胚胎等需要。
2.1.5 精密儀器區 主要放置電子天平、酶標儀、分光光度計等設備。要求工作臺有較好的水平度、有較高的抗震能力、環境溫濕度變化小、無塵等。
2.2 培養室
2.2.1 緩沖間 常設于培養室外,要求清潔、干燥和不通風,并設置紫外燈等必要的環境消毒設備。
2.2.2 培養室 常稱無菌室,是專門用于進行細胞培養和各種無菌操作的實驗室,要求清潔、干燥、無菌、不通風。室內除放置CO2培養箱、超凈臺、倒置鏡、水浴搖床、離心機和冰箱等設備外,還應有放置無菌器具的櫥柜和一定的操作空間。
2.3 其他實驗室 根據研究方向可配套建立諸如細胞遺傳學實驗室、細胞生物學實驗室、分子生物學實驗室、電生理實驗室、生化實驗室、形態學工作室等。
3 配備儀器設備
3.1 超凈工作臺 是目前普遍應用的無菌操作裝置。按氣流方向的不同可分為水平流和垂直流二種,以垂直流超凈臺較為常用,氣流從上向下流動,形成氣流屏障,能較好地保持臺面無菌和操作條件。
3.2 控溫設備 主要指CO2培養箱、三氣(O2、N2、CO2)培養箱、隔水式電熱恒溫培養。