PCR實驗室建設要點及院感管理
更新時間：2022-04-13 17:35:20瀏覽次數：0
根據聯防聯控機制綜發[2020]181號文件要求：“各地要加強三級醫院、傳染病?？漆t院、縣（區）級及以上疾控機構、海關及有條件的縣醫院實驗室建設，使其具備開展新冠病毒檢測能力”。各醫院都在進行PCR實驗室的建設工作，其中發現存在一些問題。PCR實驗室應相對獨立，盡量避免與其他普通實驗套疊或者有通道上的交叉。我們看過一個圖，他們的PCR實驗室設置在檢驗科的最里面，醫廢和標本的運送要穿過檢驗科的整個走廊，這種情況人流、物流、污物均在同一個通道，交叉感染風險較高，應盡量避免。PCR實驗室應設置以下區域：試劑儲存和準備區、標本制備區、擴增區、擴增產物分析區。這個4個區域在物理空間上必須完全獨立，各區域無論是空間上還是在使用中，應當始終處于完全的分割狀態，不能有空氣的直接相通。根據使用儀器的功能，區域可以適當合并。每個區域間設置傳遞窗，要求一側打開時另一側無法打開。4個區域應設置獨立的緩沖間，應設置可以通到四個操作區域的PCR走廊，在進入各區域前，應設置更衣間，每個區域的衣服可用不同顏色進行區分，在清潔區應設置洗澡間、衛生間、值班室。還應考慮到醫廢和標本的運送通道。PCR實驗室并沒有嚴格的凈化要求，但是為了避免各個實驗區域間交叉感染的可能性，通風方式應為機械通風，不應自然通風，且不宜使用循環風。同時要嚴格控制送、排風比例以保證各試驗區的壓力要求。PCR實驗室的空氣流向應按照試劑儲存和準備區→標本制備區→擴增區→擴增產物分析區進行，防止擴增的產物順空氣氣流進入擴增前的區域?？蛇x擇負壓排風裝置，核心區域相對于相鄰區域最小壓不小于-10Pa。也可通過安裝排氣扇或者其他方式實現。PCR實驗室要求溫度18~26℃，相對濕度30%~70%。1.進入各工作區域應當按照單一方向進行，即試劑儲存和準備區→標本制備區→擴增區→擴增產物分析區。3.各區域的衣服用不同顏色標記，離開各區域時不得將工作服帶出。4.試驗臺用移動式紫外線燈消毒，高度60-90cm。擴增區延長照射時間，最好是過夜照射。同時各區域還需安裝懸掛式紫外線燈管。5.各試驗區盡量避免不必要的走動和進出，減少交叉感染風險。6.擴增產物分析區可能會用到某些可致基因突變和有毒物質，應特別注意實驗人員的安全防護。7.試劑儲存和準備區：本區域對壓力沒有明確要求，儲存試劑和用于標本制作的消耗品等材料應當直接運送至該區，不得經過其他區域；試劑盒中的陽性對照品及質控品不應當保存在該區，應保存在標本處理區。8.標本制備區：相對于臨近區域應為正壓，以避免臨近區域進入本區的氣溶膠污染。9.擴增區：相對于臨近區應為負壓，為避免氣溶膠所致的污染，應當盡量減少在本區域內的走動。必須注意的是，所有經過檢測的反應管不得在此區域打開。10.擴增產物分析區：相對于臨近區域應為負壓。本區域是最主要的擴增產物來源，因此必須注意避免通過本區域扥物品帶出。廢液必須收集至1mol/L的HCl中，并且不能在實驗室內傾倒，而應在遠離實驗室的地方倒掉。用過的吸頭也必須放至1mol/L的HCl中浸泡后再放到垃圾袋中按程序處理，如焚燒等。本區域需要配置高壓滅菌鍋用以滅活擴增后的標本。一些醫院的設計稿基本都是這個樣子。這個布局在院感上明顯的不符合“三區兩通道”的要求：只有污染區（四個操作間）、潛在污染區（PCR走廊）、沒有清潔區（洗澡間、值班室），沒有醫廢通道和標本運送通道，沒有更衣間來穿戴防護用品，穿脫防護用品、可復用防護用品的浸泡、清潔用具存放均在狹小的緩沖間進行。各醫院的PCR實驗室的建設主要還是參考《醫療機構基因擴增檢驗實驗室工作導則》（2010版），該導則重點強調了實驗操作區域的設置，未考慮到感控的部分流程。因此，建議各醫院設計PCR實驗室時還是需要感控專職人員提前介入，以免建好之后再改建，延長工期、浪費財力。最后還是要強調一下PCR實驗室的終末消毒，這涉及到醫務人員的人身安全因此必需關注：
PCR實驗室環境分區清潔
清潔區：辦公室和會議室等有窗戶的區域若無明顯污染，應每天定期開窗通風換氣數次，濕式清潔桌面、臺面和所有物體表面和地面至少1次。儲物室、培養室和試劑配制室等無窗戶的清潔區若無明顯污染，每天早晨濕式清潔桌面、臺面和地面至少1次。半污染區：定期進行半污染區環境清潔消毒，每天工作結束后，物體表面、地面和空氣各清潔消毒1次。污染區：遇到污染情況隨時消毒，每天工作開始前及結束工作后，生物安全柜、實驗室臺面、地面和空氣各消毒1次，廢棄標本和實驗污物應分類進行消毒滅菌處理；注：有人條件下，不得使用化學消毒劑進行超低容量噴霧和紫外線燈空氣消毒。目前PCR實驗室開展核酸檢測，僅靠人工進行物體表面和環境的消毒耗費了大量的人力和時間，因此空氣與物體表面聯合消毒，建議可以采用過氧化氫終末消毒系統，實驗研究結果顯示采用過氧化氫蒸汽對微生物實驗室空氣進行消毒時，H2O2 劑量為 7. 0 ml /m3和 10. 5 ml /m3 時消毒 30 min 后，符合空氣消毒的要求; 對微生物實驗室工作臺面及墻面進行消毒時，H2O2劑量 7. 0、10. 5 ml /m3 時，消毒 30 min 后符合物體表面消毒的要求。過氧化氫蒸汽對微生物實驗室工作臺面、墻面等物體表面及空氣消毒效果較好，可以作為微生物實驗室的綜合消毒或終末消毒方法使用。干霧化過氧化氫可有效殺滅實驗室內環境表面的微生物，設備自動化程度高和效果一致性好，適用于物體和環境的終末消毒。由于其使用過氧化氫濃度較低、時間較短，可大大降低腐蝕或老化醫療設備的風險。
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